在定性檢測試劑臨床試驗(yàn)里，當(dāng)你的試驗(yàn)體外診斷試劑（就是你要注冊的那個(gè)新試劑）和用來對比的方法（比如已上市的好試劑或者金標(biāo)準(zhǔn)方法）測出來的結(jié)果不一樣了，該怎么辦。這個(gè)問題挺關(guān)鍵的，直接關(guān)系到怎么判斷你的新試劑到底好不好用。

做定性檢測試劑的臨床試驗(yàn)，核心目的就是看看你這個(gè)新試劑測的準(zhǔn)不準(zhǔn)。怎么判斷準(zhǔn)不準(zhǔn)呢？通常就是拿它和一個(gè)公認(rèn)靠譜的方法比，這個(gè)靠譜的方法就是“對比方法”。但試驗(yàn)做下來，有時(shí)候會發(fā)現(xiàn)，同一個(gè)樣本，你的新試劑說是陽性，對比方法說是陰性；或者反過來，新試劑說陰性，對比方法說是陽性。這就是檢測結(jié)果不一致了。遇到這種情況千萬別慌，也別想著隨便糊弄過去或者直接忽略。國家藥監(jiān)局的指導(dǎo)原則和官方答疑里都明確說了，必須認(rèn)真對待這些不一致的結(jié)果，有一套規(guī)范的處理流程。 思途CRO在項(xiàng)目中就經(jīng)常要幫客戶處理這類問題。咱得把這些不一致的樣本搞清楚，弄明白會不會影響最終對你新試劑性能的判斷。下面就是具體的處理步驟。

第一步 確認(rèn)不一致結(jié)果

這步很簡單，就是把所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)拿出來，一個(gè)個(gè)樣本看。主要看兩種結(jié)果：

（1）你的新試劑測出來是陽性，但對比方法測出來是陰性。

（2）你的新試劑測出來是陰性，但對比方法測出來是陽性。

把這些樣本都挑出來，單獨(dú)列個(gè)清單。記住，這些樣本非常重要，不能隨便扔掉不管。

第二步 綜合分析不一致原因

把這些不一致的樣本挑出來后，不能放著不管，得好好想想為啥會不一樣?？赡艿脑蚱鋵?shí)挺多的：

（1）樣本本身的問題：樣本是不是放太久了變質(zhì)了？采集的時(shí)候操作不規(guī)范？或者樣本里有什么干擾物質(zhì)影響檢測？

（2）操作問題：做試驗(yàn)的人操作失誤了？比如加樣量不準(zhǔn)、孵育時(shí)間不對、洗板沒洗干凈等等。

（3）試劑問題：你的新試劑本身可能在這個(gè)樣本上表現(xiàn)不穩(wěn)定？或者對比方法（即使是好試劑）也可能偶爾出點(diǎn)小差錯(cuò)？

（4）臨界值附近：樣本本身的指標(biāo)濃度正好卡在你設(shè)定的陽性判斷值（Cut-off值）附近，這種樣本本身就容易測不準(zhǔn)，兩邊結(jié)果波動一下就可能不一樣了。

（5）方法學(xué)差異：你的新試劑和對比方法用的檢測原理可能不一樣（比如一個(gè)用抗體，一個(gè)用核酸擴(kuò)增），針對的目標(biāo)物也可能有細(xì)微差別，這本身就可能導(dǎo)致在某些樣本上結(jié)果不同。

好好查查實(shí)驗(yàn)記錄，看看這些樣本當(dāng)時(shí)的檢測情況，操作有沒有問題，儀器狀態(tài)怎么樣。這一步分析主要是為了心里有數(shù)，看看問題大概出在哪。

第三步 用參考方法或其他方法進(jìn)行復(fù)核分析

光分析原因還不夠，為了更清楚地知道到底誰測對了、誰測錯(cuò)了，或者這個(gè)樣本真實(shí)情況到底是什么，需要對這些不一致的樣本進(jìn)行“復(fù)核”。

（1）用什么復(fù)核？ 最理想的是找一個(gè)更權(quán)威、更準(zhǔn)確的方法，也就是“臨床參考標(biāo)準(zhǔn)”。比如，診斷某種感染的試劑，可以用病原體分離培養(yǎng)鑒定（如果可行的話）或者公認(rèn)的核酸檢測金標(biāo)準(zhǔn)方法來做最終判定。如果找不到完美的金標(biāo)準(zhǔn)，也可以用其他被廣泛認(rèn)可、相對更可靠的方法。

（2）關(guān)鍵點(diǎn)：這個(gè)復(fù)核工作怎么做，用什么方法做復(fù)核，必須在你開始做臨床試驗(yàn)之前，就寫在你的臨床試驗(yàn)方案里！ 不能等結(jié)果出來了再臨時(shí)想轍。方案里要寫清楚復(fù)核的方法是什么，依據(jù)是什么。

（3）復(fù)核結(jié)果怎么用？ 復(fù)核出來的結(jié)果很重要，它能告訴你：

a.到底哪個(gè)試劑/方法在這個(gè)樣本上測對了？

b.這個(gè)樣本的真實(shí)狀態(tài)到底是什么（陽性還是陰性）？

c.幫助你更深入地理解為什么會出現(xiàn)不一致。

但是！請注意一個(gè)非常重要的規(guī)定：這個(gè)復(fù)核出來的結(jié)果，不能直接混到原來你統(tǒng)計(jì)新試劑性能的數(shù)據(jù)里去！ 比如原來你算靈敏度、特異度、總符合率、Kappa值這些指標(biāo)，是用新試劑和對比方法直接比較的數(shù)據(jù)來算的。復(fù)核結(jié)果不能加進(jìn)去重新算這些指標(biāo)。它只能用來單獨(dú)分析不一致的原因，以及幫助你判斷不一致結(jié)果是否影響整體結(jié)論。 這點(diǎn)在《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則》等文件里反復(fù)強(qiáng)調(diào)。思途CRO在幫客戶整理報(bào)告時(shí)對此非常注意。

第四步 評估對產(chǎn)品臨床性能判定的影響

前面幾步都做完了，最后一步也是最關(guān)鍵的：綜合看看這些不一致的結(jié)果，特別是復(fù)核分析的結(jié)果，到底會不會影響你對你這個(gè)新試劑整體性能的判斷？

（1）不一致樣本多不多？ 如果只是零星幾個(gè)樣本不一致，而且復(fù)核發(fā)現(xiàn)大多是操作失誤或者樣本本身問題，或者兩邊都在臨界值附近波動，那可能對整體性能評價(jià)影響不大。

（2）不一致集中在哪？ 是主要集中在某一類樣本上（比如某種疾病、某種樣本類型）？還是分散在各個(gè)地方？如果集中在一類，可能說明你的新試劑在這個(gè)特定情況下有局限性。

（3）復(fù)核結(jié)果偏向誰？ 如果復(fù)核結(jié)果顯示大部分是新的試劑測錯(cuò)了，那問題就比較嚴(yán)重了，說明它的準(zhǔn)確性可能達(dá)不到要求。如果大部分是對比方法測錯(cuò)了，那說明你的新試劑可能在某些方面更優(yōu)，但也得分析清楚原因。

（4）總體性能指標(biāo)怎么樣？ 最后還是要回頭看整體統(tǒng)計(jì)出來的性能指標(biāo)（靈敏度、特異度、符合率等）是不是達(dá)到了你方案里設(shè)定的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)？如果達(dá)到了，而且不一致樣本有合理解釋，那一般問題不大。如果沒達(dá)到，或者不一致樣本數(shù)量多且無法合理解釋，那可能就通不過審評了。

在臨床試驗(yàn)報(bào)告里，你必須清清楚楚地寫明白：

（1）總共發(fā)現(xiàn)了多少不一致樣本。

（2）對這些樣本做了哪些復(fù)核分析（用了什么方法）。

（3）復(fù)核的結(jié)果大概是什么情況。

（4）你認(rèn)為這些不一致會不會影響最終判定新試劑的性能，理由是什么。

最后總結(jié)一下

在定性檢測試劑臨床試驗(yàn)里，遇到新試劑和對比方法結(jié)果不一致，這事兒很正常，關(guān)鍵是要按規(guī)矩處理好。核心步驟就四步：先把不一致樣本找出來；然后分析可能的原因；接著用更靠譜的方法（臨床參考標(biāo)準(zhǔn)或其他恰當(dāng)方法）對這些樣本再做一次，看看到底誰對誰錯(cuò)，樣本真實(shí)情況是啥，這一步的方法必須提前寫在方案里；最后，結(jié)合復(fù)核結(jié)果和整體數(shù)據(jù)，判斷這些不一致會不會影響最終結(jié)論。千萬記住，復(fù)核得到的新數(shù)據(jù)，不能混到原來統(tǒng)計(jì)性能的數(shù)據(jù)里重新計(jì)算指標(biāo)。 把這些步驟做到位了，分析清楚了，才能在報(bào)告里給審評老師一個(gè)清晰、可靠的交代，說明你的新試劑性能到底如何。 思途CRO在協(xié)助客戶進(jìn)行醫(yī)療器械注冊申報(bào)時(shí)，嚴(yán)格遵循這些原則來處理不一致結(jié)果。